加急见刊

藏獒犬IFNγ基因的克隆表达及其生物学活性测定

宋世斌; 陈国华; 胡永浩; 贾怀杰; 何小兵; 景志忠; 仝保全 甘肃农业大学动物医学院; 甘肃兰州730070; 甘肃农业职业技术学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜与病原生物学国家重点实验室; 兰州原生獒园

摘要：通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆IFNγ全基因,其大小为501bp,编码167个氨基酸,前23个AA为信号肽,与GenBank上发表的犬IFNγ（（NM001003174.1）比较,序列的同源性为99.4%。构建了原核表达载体pET-30a-IFNγ,转化BL2L,IPTG诱导后表达约23Kd的重组蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化后,纯度达90%以上;利用抑制病毒噬斑法测定重组藏獒犬γ干扰素的生物学活性,结果显示纯化的蛋白具有一定的抗病毒活性,本研究结果为进一步研究犬γ干扰素的抗病毒活性奠定基础。

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