重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测拟态弧菌
摘要:根据编码拟态弧菌不耐热溶血素(Vibrio mimicus heat-labile hemolysin,VmhA)的基因保守序列,设计重组酶聚合酶扩增(RPA)特异性引物,建立拟态弧菌vmhA基因的RPA检测方法并测试其特异性、灵敏度和应用效果。结果显示,建立基于RPA的检测方法特异性好,能够从拟态弧菌中扩增得到467bp的特异性条带,仅需在37%下恒温反应40min,不需要特殊的仪器设备;对比RPA和PCR两种检测方法的灵敏度一致,均达到0.1ng/μL。应用检测结果也表明该方法与传统培养方法相当。因此,本研究建立的RPA方法检测vmhA特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室快速检测。
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