实验室快速检测细胞株支原体污染的方法研究
摘要：目的建立快速可靠的实验室检测细胞株培养中支原体污染的方法。方法采用DNA荧光染色试剂对本实验室11株细胞进行荧光染色观察与分析；同时从常见污染细胞的支原体16SrRNA中选择两段高度保守的核酸序列，作为支原体引物，采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）法对同一批细胞株进行检测，并对两种检测结果进行比较。结果采用DNA荧光染色法检出11株细胞中有2株细胞出现阳性，阳性率为18．2％；采用PCR方法检测11株细胞，有4株细胞出现阳性，阳性率为36．4％。通过两种方法比较可以发现：DNA荧光染色法检测结果阳性的细胞株用PCR方法检测结果也是阳性。结论上述两种方法均能有效地检出细胞株中的支原体污染，DNA荧光染色法虽较PCR法灵敏度低，但操作简便易观察；而PCR法成本较高，将两种方法结合应用，对DNA荧光染色法可疑阳性的标本再进行PCR检测，既提高阳性检出率，又节约了成本。
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