加急见刊

巴西龟眼炎病原菌的分离鉴定及组织病理学研究

叶明皓; 胡秀彩; 吕爱军; 孙敬锋; 刘小雪; 宋亚娇 天津农学院水产学院; 天津市水产生态及养殖重点实验室; 天津300384; 河南师范大学水产学院; 河南新乡453007

摘要:为防治龟类细菌性眼炎病,从患眼炎巴西龟Trachemys scriptaelegans(体质量约150.0 g)眼内分泌液中分离获得1株革兰氏阴性细菌,编号为G0503菌株,通过细菌形态学观察、理化特性、16S rDNA克隆和测序,以及构建系统发育进化树分析等方法,对其进行了鉴定研究。结果表明:该分离菌与甘露糖、半乳糖、肌醇等反应为阳性,与赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶等反应为阴性;进一步采用PCR方法扩增其16S rDNA序列,将其亚克隆至pMD18-T载体中测序,获得片段大小为1500 bp,与模式菌株Providencia rettgeri DSM 4542(AM040492.1)序列一致性为99.30%;构建系统发育树分析显示,该菌与Providencia rettgeri(JN644501.1)自然聚为一支,最终判定G0503菌株为雷氏普罗威登斯菌Providencia rettgeri;药敏试验结果显示,该菌株对头孢哌酮、头孢噻肟、诺氟沙星、左氟沙星、氟苯尼考等药物敏感,对阿莫西林、氨苄西林、磺胺异恶唑、复方新诺明等耐药;用该分离菌人工回归感染巴西龟死亡率达40%,主要呈现眼睛肿大、黏液增多,停止摄食等特征,并且与自然发病龟临床症状一致;组织病理学观察显示,病龟出现眼睑上皮细胞减少、淋巴细胞浸润等病理变化。本研究中首次报道巴西龟眼炎病原的分离鉴定,对该病防治可提供一定的参考依据。

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