复方消经痛胶囊的毒理学研究

作者：李兰芳 李国风 解丽君 张勤增 李存满 梁良 郝娜 张建新

【关键词】 消经

摘要：目的观察动物口服复方消经痛胶囊的急性毒性和长期毒性反应。方法采用最大给药量法测定小鼠口服复方消经痛胶囊的急性毒性；以8.0，4.0，2.0 g /kg 3个剂量的复方消经痛胶囊（相当临床用量80、40、20倍) iq SD大鼠，连续90 d，观察服药90 d及停药第14天时，大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、组织病理指标的变化。结果小鼠1 d内iq复方消经痛胶囊最大给药量为40 g/kg，相当于临床拟给药量的400倍。长期毒性实验中，给药90 d，高剂量组肝脏、脾脏、肾脏、睾丸的重量系数高于对照组（P<0.05或P<0.01）;中剂量组肝脏重量系数增高（P<0.05）。病理学检查显示，高剂量组2只大鼠肝细胞可见点状坏死，4只大鼠脾脏白髓细胞疏松分布，各只雄性大鼠睾丸生精小管管腔直径增大，各层生精上皮细胞数目增多。中剂量组雄性大鼠睾丸内可见局灶性睾丸间质细胞增生。停药14 d后，高剂量组大鼠除睾丸重量系数与对照组比较仍高（P<0.01）外，其余均正常。病理学检查，高剂量组大鼠睾丸组织仍有上述改变，其它脏器正常。结论复方消经痛胶囊在规定剂量下服用是安全可靠的。

关键词：复方消经痛胶囊； 急性毒性； 长期毒性

Toxicologic Study on Fufang Xiaojingtong Capsule

Abstract:ObjectiveTo abserve the acute toxicity in mice and the long-period toxicity Fufang Xiaojingtong Capsule(FFXT) in rats.MethodsThe maximum administration dosage(MAD) of FFDX were determined by iq administration in mice . 80 SD rats were randomly pided into four groups: high， middle， and low dose of FFXT and control group. FFXT was continuously administrated for 90 days. When the experiment was finished and withdrawed for 14 days， rats were killed and the growth condition， blood cell counting and biochemical targets were measured. Histomorphological examination were simultaneously performed. ResultsThe MAD of FFXT by iq administration was greater than 40.0g/kg in mice. In the long-period toxicity test， the weight coefficients of livers，spleens，kidneys and testis were larger in high dose group than that of in control group. The punctiform necrosis in the liver were found in two rats for high dose group. The white pulp cells in spleen were rarefactively distributed in four rats for high dose group. The seminiferous tubule diameter of testis and the amout of seminiferous epithelial cells increased in male rats. Focal in terstitical cells of testis were propagated in male rats for middle dose group. The weight coefficients of testis were larger only in high dose group than control group at the 14 days after withdrawal. ConclusionIt could be concluded that FFXT is safe to be administrated in the dose prescribed .

Key words:FuFang XiaoJingtong Capsule; Acute toxicity; Long-period toxicity

复方消经痛胶囊是由黄芪、白芍、当归和香附等9味中药组成。具有活血通络，调经止痛的功效，主要用于治疗妇女原发性和继发性痛经，对于月经不调也有较好的治疗作用。本研究对其毒理学进行了研究，为临床应用提供安全性依据。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 动物昆明种小鼠，18～22 g，雌雄各半，合格证号：医动字第070102； SD大鼠，80～90 g（6周龄），雌雄各半，合格证号：<医动字>：070101，均由山西医科大学实验动物中心提供。动物实验室环境：温度18～25℃，湿度45%～55%。

1.1.2 药物复方消经痛胶囊，批号：020325，河北省医学科学院药物研究室研制，实验前将胶囊内药粉用蒸馏水配制成各剂量组灌胃所需浓度的悬浮液。

1.1.3 仪器Eppendorf Ecom-F 6124型半自动生化分析仪，德国倍肯公司； CA-500型自动血球计数仪，日本AITAIKE公司的；JA2003型电子天平，上海精密科学仪器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 小鼠口服急性毒性实验根据预实验结果，未测出复方消经痛胶囊iq给药的LD50，因此取20只小鼠，按文献方法［1］实验，禁食12 h，以质量-体积分数为50%的给药浓度，0.4 ml/10 g体重的给药体积，2次/d，间隔6 h，iq复方消经痛胶囊每次20 g/kg，观察14 d，记录动物死亡及毒副反应症状。实验结束时，将全部动物处死，解剖，肉眼检查主要脏器组织病变情况，计算小鼠口服复方消经痛胶囊的最大耐受量。

1.2.2 大鼠长期毒性实验［2，3］实验前将大鼠在动物实验室饲养观察1周，按性别和体重随机分为4组，空白对照组、复方消经痛胶囊3个剂量组（8.0，4.0，2.0 g /kg）（相当临床用量80，40，20倍)，每组20只，雌雄各半。各组均iq给药，给药体积为20 ml/kg体重，于每天上午灌胃给药1次，空白对照组灌等体积蒸馏水，连续90 d。给药前及给药期间每周称动物体重1次，并根据体重变化调整给药体积。实验期间每天观察大鼠一般状态、体征、摄食量、饮水及粪便状况。于末次给药后24 h，对照组和各给药组各抽取大鼠14只（♂7 ♀7）；停药后第14天各组抽6只（♂3 ♀3），用20%乌拉坦麻醉，从腹主动脉取血，检查血液学和血液生化学指标。血液学检查项目有：血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）、红细胞计数（RBC）、网织红细胞计数、白细胞计数（WBC）、白细胞分类（DC）、凝血时间。血液生化学检查项目有：天门冬氨酸氨基转换酶（AST）、丙氨酸氨基转换酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）、总胆红素（T-BIL）、肌酐（Grea）、总胆固醇（T-CHO）。取血后立即剖取动物心、肝、肾、脾、肺、肾上腺、甲状腺、胸腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫、脑、前列腺等脏器称重，根据体重计算器官重量系数。并进行肉眼观察后用10%的甲醛溶液浸泡固定，作组织切片，镜下检查病理学变化。

2 结果

2.1 小鼠口服急性毒性实验2次/d灌服复方消经痛胶囊40.0 g /kg后，动物活动，进食进水未见任何异常。观察14d动物无死亡。肉眼尸检未见主要脏器组织明显异常。复方消经痛胶囊小鼠口服最大给药量>40.0 g/kg。此剂量是临床成人（按60 kg计）每日口服剂量0.1 g/kg的400倍，属实际无毒级［4］。

2.2 大鼠长期毒性实验

2.2.1 一般状况给药90 d及停药14 d期间，动物无一例死亡，各组大鼠的自主活动、饮水、摄食、排泄等均未见异常反应。各给药组动物在各时间的体重分别与对照组体重比较，均无明显差异。实验结果表明，复方消经痛胶囊连续用药90 d，对大鼠的生长发育（体重增长）无毒性影响。结果见表1。

2.2.2 血液学指标给药90 d及停药第14天后，各给药组大鼠血液学指标（RBC、HGB、PLT、WBC及分类）与空白对照组比较，差异无显著性意义，并且均在正常值范围。因此认为，复方消经痛胶囊连续用药90 d和停药第14天，对大鼠的外周血象无明显影响。结果见表2。

2.2.3 血液生化学指标给药90 d后及停药第14天后，各给药组血液生化学指标（AST，ALT，ALP，BUN，TP，ALB，GLU，T-BIL，Crea，T-CHO）与空白对照组比较，均无明显差异。结果见表3。

表1 连续给药90 d及停药14 d对大鼠一般情况和体重的影响（略）

表2 连续给药90 d及停药14 d对大鼠血象的影响（略）

表3 连续给药90 d及停药14 d对大鼠生化指标的影响（略）

2.2.4 脏器系数给药90 d，各给药组大鼠的主要脏器系数与空白对照组比较，高剂量组肝脏、脾脏、肾脏、睾丸的重量系数高于对照组（P<0.05或P<0.01）;中剂量组肝脏重量系数增高（P<0.05）。停药第14天后，除高剂量组睾丸重量系数仍然高于对照组（P>0.01）外，其余各组各脏器系数与空白对照组比较均无明显差异。结果见表4。

表4 大鼠连续给药90 d及恢复14 d脏器系数（略）

2.2.5 病理组织学检查给药90 d，肉眼观察各给药组脏器未见明显改变。病理组织学检查显示，高剂量组2只大鼠（♂1♀1）肝细胞可见点状坏死，淋巴细胞浸润； 4只大鼠（♂2♀2）脾脏白髓细胞疏松分布，动脉周围淋巴鞘内T淋巴细胞数目减少，淋巴小结结构模糊，脾窦内含铁血黄素数目增多；雄性（♂10）大鼠睾丸生精小管管腔直径增大，各层生精上皮细胞数目增多，尤以精原细胞、初级精母细胞数目增多明显，各生精小管间的睾丸间质细胞数目增多。中剂量组雄性（♂10）大鼠睾丸内可见局灶性睾丸间质细胞增生，但生精小管管腔直径增大、上皮细胞数目增多不明显。其余各组各脏器未见异常。停药第14天，高剂量组大鼠睾丸组织的改变未见明显减轻，肝脏、脾脏等其它脏器均正常。中、低剂量组各动物各脏器同对照组比较均未见异常。

3 结论

3.1 复方消经痛胶囊推荐成人临床用量最高为0.1g/(kg・d)，小鼠1 d口服最大给药量为40 g/kg，相当于成人用量的400倍。 3.2 复方消经痛胶囊按8.0，4.0，2.0 g /kg 3个剂量（分别为成年人临床用量的80倍，40倍，20倍）给大鼠灌胃，连续90 d，大鼠一般状况、血液学指标、血液生化学指标均未见异常。高剂量组（8.0 g /kg）肝脏、脾脏、肾脏、睾丸重量系数较对照组增高（P<0.05或P<0.01），中剂量肝脏重量系数增高（P<0.05）。病理组织学检查显示，高剂量组2只大鼠肝细胞可见点状坏死，淋巴细胞浸润；4只大鼠脾脏白髓细胞疏松分布，动脉周围淋巴鞘内T淋巴细胞数目减少，淋巴小结结构模糊，脾窦内含铁血黄素数目增多；雄性大鼠睾丸生精小管管腔直径增大，各层生精上皮细胞数目增多，尤以精原细胞、初级精母细胞数目增多明显，各生精小管间的睾丸间质细胞数目增多。中剂量组雄性大鼠睾丸内可见局灶性睾丸间质细胞增生，但生精小管管腔直径增大、上皮细胞数目增多不明显。其余各组各脏器未见异常。停药14 d后大鼠的一般状况、血液学指标、血液生化学指标均正常。脏器重量系数除高剂量组睾丸系数仍比对照组高（P<0.01）外，其余均恢复正常。病理组织学检查，高剂量大鼠睾丸组织改变未见明显减轻，其余各组各脏器均正常。提示该药在大剂量长期服用，可使肝、脾和睾丸组织发生改变，肝脏和脾脏的改变是可逆的，停药后可恢复。睾丸的组织改变是药理作用还是毒性反应有待进一步研究。复方消经痛痛胶囊在临床上以治疗痛经和月经不调，一般情况下是女性服用，综合实验结果认为，该药在规定剂量下服用是安全可靠的。

［1］ 国家药品监督管理局.中药新药研究的技术要求［S］.1999：11. ［2］ 袁伯俊，王治乔.新药临床前安全性评价与实践［M］.北京：军事医学科学出版社，1997：23. ［3］ 周立国.药物毒理学［M］.武汉：湖北科学出版社，2001：20. ［4］ 赵秀文.谈新药毒理实验的技术要求［J］.中药通报，1988，13（7）：53.