到手香水提液及挥发油毒理学研究

【摘要】 目的对到手香进行毒理学研究，包括到手香水提液急性毒性实验和到手香挥发油急性毒性实验。方法将到手香水提液以最大浓度4.706 g/ml，最大剂量0.8 ml/20 g对小鼠灌胃给药，测定到手香水提液对小鼠的最大耐受量。采用霍恩氏（Horn）法，将小鼠随机分4组，按1.0，2.15，4.62，10.0 ml/kg剂量对小鼠灌胃给药，测定到手香挥发油对小鼠半数致死量。结果到手香水提液（折算为生药量）对小鼠最大耐受量：188.2 g/kg，到手香挥发油对小鼠LD50为：2.37 ml/kg。结论到手香水提液对小鼠无明显急性毒性，到手香挥发油对小鼠有一定的急性毒性。

【关键词】 到手香 急性毒性 最大耐受量 半数致死量

Abstract:ObjectiveTo study the acute toxicity of water soluble extract and the volatile oil of Coleus amboinicus Lour.(CAL) in mice.MethodsThe maximum administration dosage (concentration 4.706 g/ml， dose 0.8ml/20g) of the water soluble extract were determined by iq administration in mice. The maximal tolerance dose (MTD) of water soluble extract of CAL to mice was measured. Using Horn's method， mice were randomly pided into four groups and given different doses (1.0， 2.15， 4.62， 10.0 ml/kg). LD50 of volatile oil of CAL to mice was measured. ResultsMTD of water soluble extract of CAL was 188.2 g/kg， and LD50 of volatile oil of CAL was 2.37 ml/kg. ConclusionWater soluble extract of CAL is not acutely toxic to mice， and volatile oil of CAL is acutely toxic to mice in a certain degree.

Key words:Coleus amboinicus Lour.; Acute toxicity; The maximal tolerance dose; LD50 到手香Coleus amboinicus Lour.，别名左手香、印度薄荷，为唇形科鞘蕊花属植物，原产自印度的拉贾斯坦邦，在印度广泛栽培，后传至东南亚，在国外作为一种香料兼药用植物。

国内的《现代中药大辞典》《中国植物志》《广东植物志》等均未收录，郭华仁等［1］将其归入没有在台湾收录过的原产东南亚观赏植物目录中，该植物在广东民间偶有种植。到手香全草有清凉、消炎、祛风、解毒等功效，可用于治感冒、发烧、扁桃腺炎、喉咙发炎、肺炎、寒热、头痛、呕吐泻泄等；外用于火刀伤；民间还用来治蜂伤、硫酸泼伤、烫伤等。

未查到有资料对到手香的毒理学进行研究。为给到手香使用提供安全的实验数据，本文对到手香进行毒理学研究，包括到手香水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）和到手香挥发油急性毒性实验（LD50测定）。将到手香水提液浓缩为最大浓度，以最大给药剂量对小鼠灌胃给药，在规定时间内观察小鼠情况，以测定到手香水提物对小鼠的最大耐受量，本文采用霍恩氏［2］（Horn）法，测定到手香挥发油对小鼠半数致死量，即 LD50值测定。

1 材料

1.1 药材及水提液的制备和挥发油的提取 到手香，2001年引种于阳西县原中山医科大学药材基地，在中山大学校园内繁殖。到手香水提液最大浓度浓缩液（稠膏）的制备：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密称取碎叶， 加一定体积蒸馏水，浸泡后加热煮沸提取，冷却后用双层纱布过滤，滤渣用蒸馏水清洗3次并过滤，弃去滤渣，合并滤液。滤液再用布氏漏斗垫双层滤纸抽滤，得到滤液为到手香水提液。在温度为70℃、压力为-0.08 MPa、转速为60 r/min的条件下，减压蒸馏浓缩至最大浓度稠膏，并保证稠膏不会凝结，得到到手香水提液最大浓度浓缩液（稠膏）［3］，浓度为4.706 g/ml。供小鼠最大耐受量实验用。挥发油的提取：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密称取碎叶50.0 g于1 000 ml蒸馏瓶中，加入600 ml蒸馏水，按《中国药典》规定的方法挥发油测定法［4］提得黄色油状物， 出油率为1.2%。取挥发油适量， 用食用油稀释至各个浓度，供霍恩氏法LD50测定用。

1.2 动物昆明小鼠，体重18～22 g，普通级标准，合格证号：粤检证字第2003A030号，由原第一军医大学(现更名为南方医科大学)实验动物中心提供。

2 方法

2.1 到手香水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）选择健康昆明小鼠，体重在18～22 g共20只，雌雄各半，按性别分两组，每组10只，称重和标记，分开饲养，实验前和实验的观察期内，均按正常饲料条件饲养。 灌胃给药：灌胃给药小鼠1次，0.8 ml/20 g（到手香水提液浓度 4.706 g/ml）。连续观察14 d，详细记录动物的反应情况，包括饮食、运动状况、排泄状况等各个指标，计算出总给药量（折合生药量g/kg）。

2.2 到手香挥发油急性毒性实验 （霍恩氏法LD50测定）选择健康昆明小鼠20只，体重18～22 g，称重、标记，随机分4组，每组5只，雌雄分别为2，3只。各组小鼠分别灌胃给药 0.4 ml/20 g （给药前禁食16 h，不禁水）。给药后连续观察7 d，详细记录动物的反应情况，包括饮食、运动状况、排泄状况、死亡时间及当时状况等各个指标［5］。

到手香挥发油浓度：用食用油将到手香挥发油稀释至各个浓度：0.05，0.1075 ，4.65，10.0 ml/ml，给药剂量递增比为1013=2.15，分别为1.0，2.15，4.62，10.0 ml/kg。

3 结果

3.1 到手香水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）小鼠雌雄各10只给药后，蜷缩少动，但很快就恢复正常，小鼠无其它异常行为，7 d无小鼠死亡，且各方面状态正常，体重增至24～28 g，14 d后亦无死亡，且各方面状态正常，体重增至32～37 g，将小鼠处死，解剖观察，未见脑、心、肝、肺、脾、肾、胃、肠有肉眼可见的明显异常，毛色正常。结果见表1。表1 到手香水提液最大耐受量实验结果（略）

小鼠对到手香水提物（折算为生药量）最大耐受量：4.706 g/ml×0.8 ml/20 g=188.2 g/kg。

3.2 到手香挥发油急性毒性实验 （LD50测定）第1组、第2组各有一只在第2天死亡，其余4只除在前两天活动略为减缓外，各项指标均正常，且7 d后亦无死亡；第3组在两天内全部死亡，第4组在3 h内全部死亡（结果见表2）。后两组动物在给药后蜷缩少动，进食饮水都大为减少，甚至不进食不饮水，直至死亡未见有挣扎等任何动作，死亡后解剖观察动物，未见脑、心、肝、肺、脾、肾、胃、肠有肉眼可见的明显异常，毛色亦正常。 查霍恩氏法LD50值计算用表（剂量递增法测定LD50值计算用表A1），剂量1＝1.00 ml/kg、剂量2＝2.15 ml/kg，剂量3＝4.65 ml/kg，剂量4＝10.0 ml/kg，组1，组2，组3，组4死亡动物数为1，1，5，5，对应的LD50值为2.37 ml/kg，可信限为1.42～3.95 ml/kg。按到手香挥发油提取率1.2%折算为生药，则小鼠对到手香挥发油（折算为生药）LD50为197.5 g/kg，可信限为118.3～329.2 g/kg。

4 讨论 小鼠对到手香水提液（折算为生药量）最大耐受量：188.2 g/kg，对动物无明显急性毒性。按照20 g小鼠与70 kg人的体表面积之比为：387.9（山东中药学院《中药药理学实验讲义》1994），转换成人对到手香水提物（折算为生药量）最大耐受量：1 460.1 g/70 kg，因此可以初步推断，对人来说到手香水提物无明显急性毒性。 霍恩氏法测定小鼠对到手香挥发油LD50值为：2.37 ml/kg，可信限为1.42～3.95 ml/kg。转换成人对到手香挥发油（折算为生药量）LD50为：18.39 ml/70 kg，说明到手香挥发油对人也有一定的毒性。表2 到手香挥发油急性毒性正式实验数据（略）

到手香作为一个在国内没有收录而民间有使用的药用植物，对其毒理学研究，包括水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）和挥发油急性毒性实验（LD50测定），可为到手香使用提供安全的实验数据，对到手香的实际应用有着重要的意义。同时这是对到手香进行进一步研究与药效学研究提供理论基础和科学依据。